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HPLC系統關鍵部件的選擇與優化

[2024/5/23]

一、輸液泵的選擇與優化

輸液泵,作為HPLC(高效液相色譜)系統的心臟,其性能直接決定了整個系統的穩定性和分析結果的可靠性。在選擇輸液泵時,我們需要考慮以下關鍵性能:

  1. 流量穩定性:RSD(相對標準偏差)應小于0.5%,這對于確保定性和定量分析的準確性至關重要。
  2. 流量范圍:分析型輸液泵應具備0.1至10 ml/min的連續可調范圍,而制備型則能達到100 ml/min或更高。
  3. 輸出壓力:一般應能達到150至300 bar(約1500至3000 kg/cm²),以確保在各種色譜柱和流動相條件下均能穩定運行。
  4. 液缸容積:優先選擇液缸容積小的泵,便于清洗和更換流動相,特別適用于再循環和梯度洗脫。
  5. 密封與耐腐蝕性能:泵應具有良好的密封性和耐腐蝕性能,以確保長期穩定運行。

在泵的類型選擇上,目前應用最多的是柱塞往復泵。其優點包括液缸容積小、流量調節方便、泵壓高等。為克服其輸出的脈沖性,可采用雙泵系統(并聯或串聯)。并聯式雙泵在流量重現性上表現更佳,但價格較高,且故障率相對較高。

二、進樣器的選擇與優化

進樣器是HPLC系統中連接樣品和色譜柱的橋梁,其性能同樣關鍵。在選擇進樣器時,我們需要關注以下方面:

  1. 密封性:進樣器應具有良好的密封性能,以防止樣品泄漏和污染。
  2. 死體積:較小的死體積有助于提高柱效和分離度。
  3. 重復性:進樣器的重復性直接影響分析結果的可靠性。
  4. 進樣方式:HPLC進樣方式包括隔膜進樣、停流進樣、閥進樣和自動進樣等。不同的進樣方式適用于不同的分析需求。
  • 隔膜進樣:適用于常規分析,但不適合高壓條件,且存在記憶效應和耐溶劑問題。
  • 停流進樣:可避免高壓進樣,但存在“鬼峰”和保留時間不準的問題。
  • 閥進樣:耐高壓、進樣量準確、重復性好,是HPLC分析中常用的進樣方式。
  • 自動進樣:適用于大批量樣品的常規分析,可大幅提高分析效率。

綜上所述,在選擇和優化HPLC系統的關鍵部件時,我們需要綜合考慮其性能、適用范圍和成本等因素,以確保系統的高效、準確和穩定運行。


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